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qPCR的內(nèi)參,你選對(duì)了嗎

更新時(shí)間:2024-12-20      點(diǎn)擊次數(shù):599

什么是內(nèi)參基因?

內(nèi)參基因,也稱為管家基因,即是內(nèi)部參照,它們?cè)诟鹘M織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定,在檢測(cè)基因的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來(lái)做參照物。所以叫內(nèi)參基因。其作用是校正上樣量、上樣過(guò)程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。借助檢測(cè)每個(gè)樣品內(nèi)參的量就可以用于校正上樣誤差,這樣半定量的結(jié)果才更為可信。一般要選擇一個(gè)在處理因素作用的條件下不會(huì)發(fā)生表達(dá)改變的基因作內(nèi)參。常用的內(nèi)參基因包括GAPDH、β-actin、18 sRNA、28sRNA、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP內(nèi)參基因等。

在相對(duì)定量檢測(cè)中,最重要的是選擇合適的內(nèi)參基因;而選擇合適的內(nèi)參基因中,最重要的,則是實(shí)驗(yàn)內(nèi)參基因在不同處理間的表達(dá)穩(wěn)定性。選擇合適的內(nèi)參,是相對(duì)定量成功的開端!

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